Una terza piattaforma CRISPR-Cas per l’editing del genoma nelle cellule umane è stata presentata in un articolo pubblicato sulla rivista Nature Communications nelle scorse settimane.
l’editing del genoma con il CRISPR-Cas9
Il CRISPR/Cas9 è una versione semplificata del sistema CRISPR/Cas, ed è in grado di fornire un potente e preciso strumento di editing genetico. Grazie a questo sistema è stato così possibile modificare in modo permanente i geni di molteplici organismi.
CRISPR-Cas9 è una piattaforma versatile per l’editing del genoma, ma non è l’unica nucleasi guidata dall’RNA (un enzima che taglia il DNA) nella famiglia delle proteine Cas. Oltre a Cas9, sono state infatti identificate anche altre proteine, quali Cas12a e Cas12b. Sebbene Cas12a sia stato sviluppato appositamente per l’editing del genoma, Cas12b non è stato sviluppato in modo completo, almeno in parte a causa delle alte temperature richieste da questo enzima per poter esercitare la propria azione.
La somministrazione intracellulare tramite vettori virali
Feng Zhang e colleghi, autori dello studio, hanno studiato Cas12b poiché è una proteina più piccola rispetto a Cas9 o Cas12a, il che la rende interessante per la somministrazione intracellulare tramite vettori virali. Tuttavia, nella sua struttura originale la proteina taglia il filo non bersaglio del DNA a doppio filamento. Per superare questo, gli autori hanno ridisegnato la proteina per una maggiore attività anche alla temperatura corporea (37 °C). In esperimenti di coltura cellulare, questa proteina riprogettata mostrava una maggiore specificità per la sequenza bersaglio desiderata, rispetto a Cas9.
Il Cas12b ingegnerizzato per l’editing del genoma
Anche se sarà necessario un ulteriore lavoro di affinamento per sviluppare il Cas12b ingegnerizzato, al fine di renderlo uno strumento ampiamente applicabile come il Cas9, l’aggiunta di una potenziale terza piattaforma per l’editing del genoma espande le opzioni disponibili per la comunità di ricerca.
